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土壤基因组DNA提取试剂盒图片
产品货号:
QN0888
中文名称:
土壤基因组DNA提取试剂盒
英文名称:
Soil Genomic DNA Extraction Kit
产品规格:
50T|100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒适合于从褐土、淤泥、火山灰等各种极端土壤环境中提取微生物DNA。对土壤中各种细菌、真菌有很好裂解效果,最大限度的保留了微生物DNA的多态性。

本试剂盒采用我公司特有的腐殖质吸附材料,可高效专一的去除各种腐殖质成分而丝毫不会影响DNA的产率,纯度较酚、氯仿抽提法提高数倍。使用本试剂盒提取的DNA产量大、完整性好,可直接用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

试剂盒组成:

组分50T100T
溶液A25mL50mL
溶液B3mL6mL
溶液C5mL10mL
溶液D10mL20mL
漂洗液15mL15mL×2
洗脱液15mL30mL
吸附柱及收集管50套100套
PCR增强剂500μL1mL

储存条件:室温(15~25℃),有效期12个月,2~8℃保存时间更长。

操作步骤:
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

1.称取土壤样本0.1-0.5g,在液氮中充分研磨成细粉末,加入450μL溶液A震荡混匀。
  注:也可直接称取样本0.1-0.5g于离心管(建议使用2ml圆底管),加入450μL溶液A剧烈震荡混匀1-2min至没有固体块。使用液氮研磨效果最佳。
2.加入50μL溶液B充分颠倒混匀(不要剧烈震荡),65℃水浴6min,每2min充分颠倒混匀一次。
3.加入100μL溶液C充分颠倒混匀(不要剧烈震荡),12000rpm离心10min。
4.将上清转移到新的离心管,12000rpm离心2min。
5.在吸附柱中加入200μL溶液D,将离心后的上清加入到带有溶液D的吸附柱中,用移液器吹吸几次混匀,12000rpm离心1min。
6.将收集管中的滤出液混匀后重新吸入吸附柱(必须),12000rpm离心1min。
7.倒掉收集管中的废液,在吸附柱中加入漂洗液500μL,12000rpm离心1min。
8.倒掉收集管中的废液,重复步骤7两次(共漂洗三次)。
9.倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管,12000rpm离心2min。
10.拿出吸附柱在室温干燥数分钟(因季节及气候等因素不等),或50℃干燥1min。
11.将吸附柱放入一个新的离心管中,加入50-100μL洗脱液(65℃预热),12000rpm离心1min。
12.将离心管中的液体重新加入到吸附柱中,12000rpm离心1min。离心管中即为土壤微生物DNA溶液。
13.若产物PCR效果差,可以适当稀释DNA产物,或添加1/10体积的PCR增强剂。

注意事项:
1.新鲜的土壤样本会得到更高的产率,不同样本在采样前应先查阅相应的最佳保存条件。
2.若溶液中出现浑浊可在37℃水浴中溶解片刻至清澈,不会影响结果。
3.在需要吸取上清液的步骤中应避免吸到沉淀,否则会堵塞吸附柱,并影响产物纯度。
4.洗脱缓冲液的体积最好不少于50μL,体积过小会影响回收效率;建议使用试剂盒附带的洗脱缓冲液,用水洗脱也会损失部分产物;DNA应保存在-20℃避免反复冻融,以防降解。
5.若产物含有腐殖质残余则会严重影响DNA的光吸收值,应采取电泳检测和分光光度计检测相结合的方式鉴定。
6.液体试剂避免接触皮肤,若意外接触应立即使用大量清水冲洗。
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